Введение сыворотки по Безредко: алгоритм, схема, при дифтерии, столбняке, бутулизме

Что содержат вакцины ПСЧИ и ПСС

ПСЧИ – вакцина, содержащая специфические противостолбнячные антитела (в 1 мл находится 100 МЕ действующего вещества). Дополнительные компоненты препарата представлены глицином, который выступает в виде стабилизатора, водой для инъекций и натрием хлоридом.

ПСС (противостолбнячная сыворотка) является белковой фракцией сыворотки лошадиной крови, которую иммунизировали анатоксином (столбнячным) либо токсином. В ней присутствуют иммуноглобулины. Также в состав входит хлороформ. Выпускается сыворотка в виде прозрачной или с желтым оттенком жидкости.

ПРОИЗВОДСТВО

Производство сыворотки противостолбнячной должно быть валидировано с целью подтверждения установленных требований, гарантирующих её качество и безопасность применения.

Сыворотку получают из плазмы крови лошадей, гипериммунизированных столбнячным анатоксином/токсином. Для получения очищенной концентрированной иммуноглобулиновой фракции плазмы крови лошади, содержащей антитела (антитоксины), нейтрализующие столбнячный экзотоксин, применяют методы солевого фракционирования, ферментолиза, мембранной фильтрации.

Механизм действия

Столбняк является одной из самых опасных инфекционных заболеваний — уровень смертности детей составляет около 90% для взрослых этот показатель колеблется от 20 до 80%. Поэтому самым легким способом защитить человека от болезни является вакцинация. Вакцина содержит в себе ослабленные столбнячные (если вакцина комплексная, то и дифтерийные) токсины.

В этих токсинах сохраняются иммуногенные свойства, поэтому после введения в организм они вызывают иммунный ответ на их присутствие в виде выработки специфических антител. Организм запоминает структуру данного антигена и, в случае заболевания, выработанные антитела распознают возбудитель и помогают активно с ним бороться. Таким образом, в организме вырабатывается приобретенный иммунитет.

Он, в свою очередь, делится на естественный и искусственный приобретенный виды. При естественном иммунитете антитела синтезируются организмом самостоятельно после перенесения болезней. Пассивный же иммунитет организм приобретает посредством введения антигенов против различных заболеваний искусственным путем — то есть вакцинации.

После введения вакцины максимальная концентрация антител в крови достигается через 1-2 суток. Период выведения из организма составляет от 6 до 8 недель.

Фармакологическое действие

Лекарство Иммуноглобулин противостолбнячный – это раствор фракции белка, активной иммунологически, которая выделяется из плазмы доноров с помощью метода фракционирования этиловым спиртом при температурном режиме ниже 0 °C. Доноры были иммунизированы столбнячным анатоксином, прошли проверку на отсутствие антител к ВИЧ и гепатиту С, а также антигена вируса гепатита В. Препарат обладает свойством нейтрализовать столбнячный токсин и обеспечивает создание иммунной защиты против столбняка.

Показания к вакцинации

Препарат используют в 2 основных случаях:

• Для профилактики заболевания (в том числе и экстренной).
• Для лечения столбняка/дифтерии.

Экстренную профилактику проводят при получении различных травм (производственные, бытовые ранения, обморожения, укусы насекомых, проникающие травмы, занозы, пролежни и прочее), когда возбудитель инфекции (столбнячная палочка) может проникнуть в организм через открытую рану.

Основным местом обитания данного микроорганизма является почва, где он может оставаться активным на протяжении нескольких лет. Плановую вакцинацию проводят согласно установленному календарю прививок.

Сроки введения вакцины

Введение сыворотки по Безредко лицам, которые получили травму, необходимо осуществить в кратчайшие сроки – в течение 20 дней (если пациенты прививались от столбняка более 5 лет назад). Именно в этот период, в случае попадания возбудителя в организм, болезнь может протекать в скрытой форме – без проявления соответствующих симптомов.

Если человек не был ранее привит от столбняка/дифтерии или у него нет полного курса плановых прививок, кроме вакцины ему вводится специальная сыворотка. Она помогает за короткий период создать и выработать организмом специфический иммунитет к возбудителю болезни.

Как переносится вакцинация

Вакцинация от столбняка и дифтерии, обычно, переносится легко — без существенного ухудшения самочувствия. Часто прививание делается комплексным препаратом, который содержит в себе сразу несколько антител. Например, вакцинация от коклюша, дифтерии и столбняка (АКДС) или столбняка и дифтерии (АДС).

Такая вакцина чаще вызывает побочные реакции, поскольку является многокомпонентной. Во избежание ухудшения самочувствия после прививания рекомендуется в течение 30 мин. оставаться в больнице – в случае развития неприятной симптоматики врачи окажут необходимо помощь.

Возможные реакции и осложнения

Реакция организма на введение вакцины может быть 2 типов:

• Поствакцинальная реакция (развивается сразу либо в течение нескольких часов после введения вакцины и проходят самостоятельно примерно через 3 суток после прививки).
• Поствакцинальное осложнение (вызывает изменения в организме и ухудшение здоровья, которые длительный характер, может потребоваться терапия).

Виды реакций и возможных осложнений на вакцинацию представлены в таблице ниже:

При вакцинировании в детском возрасте дети могут жаловаться на боль во время ходьбы, зуд в месте инъекции. Во взрослом возрасте частота развития реакций на вакцинацию снижается.

Стоит отметить, что риск возможных осложнений после вакцинации в сотни, а в некоторых случаях и в тысячи раз меньше, чем риск развития осложнений после перенесенного инфекционного заболевания.

Совместимость с алкоголем и лекарствами

После введения противостолбнячной сыворотки запрещается в течение трех дней употреблять спиртные напитки.

В противном случае могут развиться побочные реакции:

• повышение температуры;
• аллергические высыпания на коже;
• дисбактериоз кишечника и понос;
• обострение хронических заболеваний.

Так же следует учитывать, что совместное введение сыворотки и столбнячного анатоксина приводит к угнетению иммунного ответа.

Инструкция по применению

Сыворотку иммуноглобулином вводят посредством внутримышечной инъекции в переднюю боковую часть бедра детям в возрасте до 3 лет. Детям старшего возраста и взрослым вакцину вводят под лопатку либо плечевую мышцу. Перед проведением инъекции флакон с лекарственным препаратом необходимо в течении 2 ч выдержать при температуре от 18 до 22 0С.

Вскрытие флакона и непосредственная процедура вакцинирования проводится при соблюдении соответствующих санитарных норм и правил. Чтобы избежать образования пены в препарате, для набора вакцины необходимо взять иглу с широким просветом, а для введения препарата использовать другую иглу.

При лечении столбняка препарат вводится внутривенно либо в спинномозговой канал. Дозировка лекарства определяется врачом в зависимости от тяжести заболевания.

Иммуноглобулин человека противостолбнячный

Инструкция по применению:
ИММУНОГЛОБУЛИН ЧЕЛОВЕКА ПРОТИВОСТОЛБНЯЧНЫЙ,
раствор для внутримышечного введения 250 ME

Регистрационный номер:

ЛСР-000791/08 от 15.02.2008

Иммуноглобулин человека противостолбнячный, раствор для внутримышечного введения представляет собой концентрированный раствор очищенной фракции иммуноглобулинов, выделенной методом фракционирования этиловым спиртом из плазмы крови доноров, иммунизированных столбнячным анатоксином и проверенных индивидуально на отсутствие поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg) и антител к вирусу гепатита С и вирусам иммунодефицита человека ВИЧ-1 и ВИЧ-2.

Концентрация белка в препарате от 10 до 16 %. Содержание антител к столбнячному токсину — не менее 50 международных единиц (ME) в 1 мл и не менее 250 MEв 1 ампуле (дозе) препарата. Препарат не содержит консервантов и антибиотиков. Стабилизатор — глицин в концентрации (2,25±0,75) %. Прозрачная или слабо опалесцирующая жидкость, бесцветная или со слабо желтой окраской. В процессе хранения допускается появление незначительного осадка исчезающего после легкого встряхивания при температуре от 18 до 22 °С.

Иммунобиологические свойства.

Действующим началом препарата являются иммуноглобулины класса G, обладающие активностью антител, нейтрализующих столбнячный токсин. Максимальная концентрация антител в крови достигается через 24-48 часов после введения; период полувыведения антител из организма составляет 3-4 недели.

Назначение.

Экстренная профилактика столбняка у взрослых и детей, не получивших полного курса иммунизации столбнячным анатоксином или с неизвестным прививочным анамнезом.

Способ применения и дозировка.

Препарат вводят внутримышечно однократно в верхний наружный квадрант ягодичной мышцы или в наружную поверхность бедра в дозе не менее 250 MEнезависимо от возраста. Запрещается вводить препарат внутривенно.

Перед инъекцией ампулу с препаратом выдерживают 2 часа при температуре от 18 до 22 °С. Вскрытие ампул и процедуру введения осуществляют при строгом соблюдении правил асептики и антисептики. Во избежание образования пены препарат набирают в шприц иглой с широким просветом, для инъекции используют другую иглу. Препарат во вскрытой ампуле хранению не подлежит. Не пригоден к применению препарат в ампулах с нарушенной целостностью или маркировкой, при изменении физических свойств (изменение цвета, помутнение раствора, наличие не разбивающихся хлопьев), при истекшем сроке годности, при неправильном хранении.

Побочные действия.

Реакции на введение иммуноглобулина, как правило, отсутствуют. В редких случаях могут развиваться местные реакции в виде небольшой гиперемии и боли в области инъекции. Возможно повышение температуры до 37,5 °С в течение первых суток после введения препарата. У отдельных лиц с изменённой реактивностью могут развиваться аллергические реакции, а в исключительно редких случаях — анафилактический шок. В связи с этим лица, получившие препарат, должны находится под медицинским наблюдением не менее 30 минут. Процедурные кабинеты, где осуществляется введение иммуноглобулина, должны быть обеспечены средствами противошоковой терапии.

Противопоказания к применению.

Противопоказано введение иммуноглобулина лицам, имевшим в анамнезе тяжелые аллергические реакции на введение препаратов крови человека. Лицам, страдающим аллергическими заболеваниями или имевшим в анамнезе клинически выраженные аллергические реакции, в день введения иммуноглобулина и в течение последующих 3 дней, рекомендуется назначение антигистаминных препаратов. Лицам, страдающим системными иммунопатологическими заболеваниями (болезни крови, соединительной ткани и т.п.), иммуноглобулин следует вводить на фоне соответствующей терапии.

Данные о введении иммуноглобулина регистрируют в соответствующих учетных формах с указанием номера серии, даты изготовления, срока годности, предприятия-производителя, дозы и даты введения, характера реакции на введение.

Взаимодействие с другими лекарственными средствами.

Препарат можно использовать в комплексе с другими лекарственными средствами при условии введения его в виде отдельной инъекции, не смешивая с другими препаратами. После введения иммуноглобулина активную иммунизацию против кори эпидемического паротита, краснухи и столбняка проводят не ранее, чем через 3 месяца.

Форма выпуска.

В ампулах по 1 дозе (не менее 250 ME) в объеме не более 5 мл (в зависимости от специфической активности). 10 ампул в пачке с инструкцией по применению и ампульным ножом или скарификатором.

Условия отпуска.

Отпускается по рецепту врача.

Срок годности. условия хранения и транспортирования.

Срок годности 2 года. Препарат с истекшим сроком годности применению не подлежит. Условия хранения и транспортирования в соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре от 2 до 8 °С в недоступном для детей месте. Замораживание не допускается.

Призводитель.

ФГУП «НПО «Микроген», Россия,
https://www.microgen.ru

Техника введения сыворотки по методу Безредко

Безредко – французский микробиолог, который предложил метод введения лечебных сывороток, основанный на уменьшении либо предупреждении негативной реакции организма и развития осложнений на них (в частности, в виде анафилактического шока). Данный способ предусматривает дробное введение препаратов.

Это позволяет нейтрализовать антитела и снизить в крови концентрацию активных веществ, в результате чего последующее введение антигенов не вызывает развитие осложнений.

Введение сыворотки по Безредко имеет определенный алгоритм:

1. Ампулу с препаратом необходимо внимательно осмотреть. Если в жидкости есть осадок, помутнение, посторонние примеси, повреждена ампула либо отсутствует этикетка с необходимой информацией – применять такой медикамент запрещено.
2. Перед вскрытием конец ампулы необходимо обработать стерильной ватой. После вскрытия ампулу следует накрыть стерильной салфеткой.

   
   Алгоритм введение сыворотки по Безредко

3. Перед тем, как ввести терапевтическую дозу, нужно провести тест на чувствительность организма к препарату посредством пробы. Для этого используется специальная разведенная сыворотка (идет в комплекте с препаратом и маркируется красным цветом). Пробу вводят подкожно в руку выше запястья, предварительно продезинфицировав место будущей инъекции. Введение препарата осуществляется специальным туберкулиновым шприцем с тонкой иглой. Как только срез иголки попадает под кожу, вводится 0,1 мл разведенной сыворотки. Если по истечению 20-30 мин. диаметр папулы, что образовалась в результате инъекции, составляет меньше 0,9 см, а вокруг нее отмечается незначительное покраснение, проба считается отрицательной.
4. После этого в наружную поверхность плеча следует подкожно ввести 0,1 мл уже неразведенной сыворотки.
5. По истечению получаса с момента инъекции (если отсутствует реакция на повторный ввод препарата) внутримышечно вводится оставшаяся назначенная доза.

Метод Безредко лежит в основе введения большинства сывороток, применяемых для лечения и предупреждения развития различных болезней.

Противостолбнячной сыворотки

Введение сыворотки осуществляется по вышеуказанному алгоритму. Дозировка препарата при лечении составляет 1500-2000 МЕ на каждый кг веса человека. Такая высокая доза позволяет быстро связать тетанотоксин, который после инфицирования организма распространяется в лимфе, крови и спинномозговой жидкости человека, провоцируя мышечные спазмы.

Если наблюдается тяжелое течение болезни, допускается следующая схема ввода сыворотки:

• Внутримышечно – вводится 100 тыс. МЕ (вводится в ягодичную мышцу или под лопатку).
• Внутривенно – до 50000 МЕ. В этом случае указанную дозировку разводят изотоническом раствором хлорида натрия (соотношение составляет от 1:5 до 1:10) и прогревают до температуры 37 0С.

При введении указанных доз в организме на протяжении 3 недель вырабатываются антитоксические антитела, поэтому повторное введение сыворотки не требуется. Дополнительно больному назначается курс антибиотиков. При необходимости могут быть проведены противошоковые меры – согревание, применение стимуляторов сердечно-сосудистой и нервных систем, переливание крови и прочее.

Если проба на чувствительность к противостолбнячной сыворотки показала положительный результат, то ее ввод можно осуществлять только при явных показаниях (например, обширное загрязнение раны).

При бутулизме

Введение сыворотки по Безредко при ботулизме осуществляется по общей схеме с проведением обязательной пробы на чувствительность к препарату. Ввод назначают сразу после установления клинического диагноза, поскольку максимальный терапевтический эффект она оказывает в первые 72 ч с начала заболевания.

Дозировка препарата, содержащего лошадиный антитоксин, зависит от того, какой тип заболевания у человека. Например, при серотипе В необходимо вводить 15-20 тыс. МЕ.

Если тип неизвестен, тогда вводится комплекс однокомпонентных препаратов либо поливалентная сыворотка по следующей схеме:

• 10000 МЕ антитоксина типа А;
• 10000 МЕ антитоксина типа Е;
• 15-20 тыс. МЕ антитоксина типа В.

Вне зависимости от степени тяжести заболевания обязательно вводится внутривенно 1 терапевтическая доза сыворотки. Ее предварительно разводят в 200 мл подогретого физиологического раствора. Если токсин ботулизма уже проник в мышечно-нервные соединения, введенный антитоксин не может его нейтрализовать, но позволяет замедлить либо полностью остановить прогрессирование болезни.

А при раневом ботулизме (попадание спор C. Botulinum, вызывающих ботулизм, в открытую рану с последующим их размножением) снижает риск появления осложнений, в том числе и летального исхода. Чтобы избежать развития аллергических и прочих нежелательных реакций организма на введение сыворотки, сначала следует уколоть больному 60-90 мл преднизолона.

Противодифтерийной сыворотки

Дифтерия является опасным инфекционным заболеванием, которое вызывает дифтерийная палочка. В 95% инфекция поражает слизистые оболочки ротоглотки. Болезнь передается воздушно-капельным путем или посредством прямого контакта с зараженным человеком. В некоторых случаях носителями инфекции могут быть кошки, лошади и собаки.

Для лечения дифтерии используется противодифтерийная сыворотка. После введения в организм она нейтрализует токсин инфекции, который циркулирует в крови.

У людей, которые имеют повышенную чувствительность к лошадиному белку, содержащемуся в сыворотке, может развиться анафилактический шок. Чтобы этого избежать, обязательно перед началом терапии проводится внутрикожная проба по указанному выше методу Безредко.

Если нет специально разведенной сыворотки, ее готовят самостоятельно посредством смешивания 0,1 мл лечебной сыворотки с 9,9 мл стерильного раствора натрия хлорида. При отрицательной реакции на введение вакцины подкожно следует ввести 0,1 мл препарата в неразведенном виде, а по истечению 30 мин. – оставшуюся дозу.

Дозировка сыворотки зависит от тяжести и формы заболевания:

• Локализированная форма (глотки, носа, кожи глаз, половых органов) – 10000-20000 МЕ вводится посредством внутримышечной инъекции.
• Ротоглотки с распространением (налет появляется на нескольких органах, например, на миндалинах и гортани) – 20000-30000 МЕ также вводится внутримышечно.

При токсической форме дифтерии

По истечении недели после заболевания человек либо выздоравливает, либо болезнь (при отсутствии лечения) переходит в более тяжелую форму – токсическую. Ее возникновение обусловлено системным воздействием дифтерийного токсина на организм, который выделяет дифтерийная палочка.

Данная форма болезни протекает тяжело с ярко выраженными симптомами:

• Высокая температура тела – 39,5–41 0С.
• Сильная головная боль.
• Бледность кожных покровов.
• Отек миндалин, затрудненное дыхание.
• Болезненность и увеличение лимфоузлов.

Дозировка сыворотки при токсической дифтерии представлена в таблице ниже:

Инъекция проводится посредством внутримышечного и внутривенного введения.

Указанное количество сыворотки вводится однократно. В случае необходимости такую же дозу препарата вводят через 24 ч. При тяжелой форме заболевания суммарная доза может быть увеличена до 90000-120000 МЕ, а иногда и до 150000 МЕ.

При развитии токсического шока, больших кровоизлияниях, вызванных несвертываемостью крови (ДВС-синдром) и прочих нарушениях заболевшему человеку сразу вводится 2/3 дозы, а на протяжении 24 ч. вводится ¾ части от суммарной дозировки. Одновременно с сывороткой пациенту назначают прием антибиотиков на протяжении 5-7 дней.

Они не угнетают дифтерийный токсин, но способствуют уничтожению опасных микроорганизмов, которые усложняют течение дифтерии.

Сыворотка противостолбнячная лошадиная очищенная концентрированная

Режим дозирования и способ применения

Экстренная профилактика столбняка: Экстренная профилактика столбняка предусматривает первичную хирургическую обработку раны и создание, при необходимости, специфического иммунитета против столбняка. Экстренную специфическую профилактику столбняка проводят при:

• травмах с нарушением целостности кожных покровов и слизистых;
• обморожениях и ожогах второй, третьей и четвертой степеней;
• внебольничных абортах;
• родах вне медицинских учреждений;
• гангрене или некрозе тканей любого типа, абсцессах;
• проникающих повреждениях желудочно-кишечного тракта;
• укусах животными.

Для экстренной специфической профилактики столбняка применяют:

• АС-анатоксин;
• иммуноглобулин человека противостолбнячный (ИЧПС);
• при отсутствии ИЧПС – сыворотку противостолбнячную.

АС-анатоксин и ИЧПС вводят в соответствии с инструкциями по применению этих препаратов.
Схема выбора профилактических средств для экстренной специфической профилактики столбняка представлена в таблице 1.

С целью экстренной профилактики столбняка сыворотку противостолбнячную вводят подкожно в дозе 3000 МЕ.

Перед введением сыворотки противостолбнячной ставят внутрикожную пробу с сывороткой лошадиной очищенной разведенной 1:100. Для постановки пробы используют шприцы с ценой деления 0,1 мл и тонкими иглами. Разведенную сыворотку вводят внутрикожно в сгибательную поверхность предплечья в объеме 0,1 мл. Учет реакции проводят через 20 мин.

Пробу считают отрицательной, если диаметр отека или покраснения, появляющегося на месте введения, менее 1 см. Пробу считают положительной, если отек или покраснение достигает в диаметре 1 см и более.

При отрицательной внутрикожной пробе сыворотку противостолбнячную вводят подкожно в количестве 0,1 мл (используют стерильный шприц, вскрытую ампулу закрывают стерильной салфеткой). При отсутствии реакции через 30 мин вводят, используя стерильный шприц, всю назначенную дозу сыворотки подкожно (с профилактической целью), внутривенно или в спинномозговой канал (с лечебной целью).

При положительной внутрикожной пробе или возникновении анафилактической реакции на подкожную инъекцию 0,1 мл сыворотки противостолбнячной дальнейшее ее введение противопоказано. В данном случае показано введение ИЧПС.

Введение препарата регистрируют в установленной учетной форме с указанием даты прививки, дозы, предприятия-изготовителя препарата, номера серии, реакции на введение препарата.

Лечение столбняка: Сыворотку противостолбнячную вводят больным в максимально ранние сроки от начала заболевания в дозе 100 000-200 000 МЕ.

Сыворотку вводят внутривенно или в спинномозговой канал после проверки чувствительности к чужеродному белку (проба с сывороткой лошадиной очищенной разведенной 1:100). В зависимости от тяжести заболевания введение сыворотки повторяют до исчезновения рефлекторных судорог.

Таблица 1 СХЕМА ВЫБОРА ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЭКСТРЕННОЙ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ СТОЛБНЯКА

• ПСС – сыворотка противостолбнячная
• ИЧПС – иммуноглобулин человека противостолбнячный

Примечания:

1. Вместо 0,5 мл АС-анатоксина можно использовать АДС-М-анатоксин, если необходима вакцинация против дифтерии этим препаратом. Если локализация раны позволяет, АС-анатоксин предпочтительно вводить в область ее расположения путем подкожного обкалывания.
2. Применять один из указанных препаратов: ИПСЧ или ПСС (предпочтительно вводить ИПСЧ).
3. При «инфицированных» ранах вводят 0,5 мл АС-анатоксина, если после последней ревакцинации прошло 5 и более лет.
4. Полный курс иммунизации АС-анатоксином для взрослых состоит из двух прививок по 0,5 мл каждая с интервалом 30-40 дней и ревакцинации через 6-12 мес той же дозой. По сокращенной схеме полный курс иммунизации включает однократную вакцинацию АС-анатоксином в удвоенной дозе (1 мл) и ревакцинацию через 6 мес — 2 года дозой 0,5 мл АС-анатоксина.
5. Две прививки по обычной схеме иммунизации (для взрослых и детей) или одна прививка по сокращенной схеме иммунизации для взрослых.
6. При «инфицированных» ранах вводят ИПСЧ или ПСС.
7. Все лица, получившие активно-пассивную профилактику, для завершения курса иммунизации через 6 мес – 2 года должны быть ревакцинированы 0,5 мл АС-анатоксина.
8. При необходимости назначать АС-анатоксин детям до 6-ти лет, препарат следует вводить внутримышечно.
9. После нормализации посттравматического состояния дети до 3-х летнего возраста – в соответствии со сроками Национального календаря профилактических прививок.

Сколько действует прививка?

Введение сыворотки по Безредко позволяет свести к минимуму развитие осложнении после поступления в организм чужеродного белка. Ввод терапевтической дозы, обычно, проводится однократно – при правильном и своевременном лечении она позволяет справиться с болезнью.

Но перенесенные дифтерия и столбняк не гарантируют того, что человек повторно ими уже не заболеет. Такую защиту от болезней не дают и прививки. Но выработанные противодифтерийные и противостолбнячные антитела посредством вакцинации защищают организм человека от проникновения возбудителей заболеваний.

Поэтому данные болезни либо не успевают развиться, либо будут протекать в легкой форме, не вызывая при этом осложнений.

Продолжительность действия прививок напрямую связана с возрастом, в котором человеку была сделана прививка:

• Дети 1-го года жизни получают 3 прививки от дифтерии и столбняка (в 3 месяца, 4,5 месяца и в полгода) с перерывом между ними минимум в 45 дней.
• В 1,6 лет делается 1-я ревакцинация.
• 6-7 лет – 2-я ревакцинация.
• 14 лет – 3-я ревакцинация.
• Детям старше 18 лет и взрослым – ревакцинация делается каждые 10 лет с момента предыдущей прививки.

Если человек в детском возрасте не был привит, то для формирования специфического иммунитета ему необходимо сделать 3 вакцинирования. При нарушении планового графика получения прививок или в случае прохождения с момента прививания больше 20 лет, человеку необходимо привиться дважды с промежутком между вакцинированием в 40 дней.

Правильное введение лечебных препаратов по методу Безредко минимизирует риск аллергических реакций и предупреждает возникновение анафилактического шока при соблюдении всех правил и алгоритма действий.

ИСПЫТАНИЯ

Описание

Прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость с желтоватым оттенком, без осадка. Определение проводят визуально.

Подлинность

Сыворотка должна нейтрализовывать действие столбнячного токсина. Определение проводят по разделу «Специфическая активность».

Прозрачность

Показатель оптической плотности не должен превышать 0,05. Определение проводят фотометрическим методом при длине волны 540 нм в кювете с толщиной слоя 3 мм, если нет других указаний в нормативной документации.

Цветность

Показатель оптической плотности не должен превышать 0,15. Определение проводят фотометрическим методом при длине волны 400 нм в кювете с толщиной слоя 3 мм, если нет других указаний в нормативной документации.

Механические включения

Видимые механические включения должны соответствовать требованиям ОФС «Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах».

рН

От 6,8 до 7,2, если нет других указаний в нормативной документации. Определение проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия».

Содержание белка

От 8 до 12 %, если нет других указаний в нормативной документации. Определение проводят колориметрическим методом с биуретовым реактивом в соответствии с ОФС «Определение белка».

Стерильность

Должна быть стерильной. Испытания проводят методами прямого посева или мембранной фильтрации в соответствии с ОФС «Стерильность».

Пирогенность

Должна быть апирогенной. Определение проводят в соответствии с ОФС «Пирогенность», если нет других указаний в нормативной документации. Указывают допустимые пределы изменения температуры тела животных и тест-дозу. Если не указано иначе, вводят 1 мл неразведенной сыворотки на 1 кг массы кролика.

Аномальная токсичность

Должна быть нетоксичной. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аномальная токсичность», если в нормативной документации нет других указаний.

Специфическая активность

Не менее 1200 международных единиц (МЕ) в 1 мл. Специфическую активность противостолбнячной сыворотки определяют в тесте нейтрализации столбнячного токсина по методу Эрлиха и выражают в МЕ/мл (1 МЕ столбнячного антитоксина – это специфически нейтрализующая активность антитоксической сыворотки в отношении столбнячного токсина, которая содержится в определенном количестве международного стандартного образца, представляющего собой противостолбнячную лиофилизированную лошадиную сыворотку).

Определение опытной дозы столбнячного токсина. Опытная доза столбнячного токсина (L+/100) представляет собой наименьшее количество токсина, которое в смеси с 0,01 ME противостолбнячной сыворотки при введении мышам в объеме 0,4 мл вызывает гибель 50 % мышей (с явлениями столбняка) на 4 сут.

Готовят несколько разведений столбнячного токсина, различающихся между собой на 10 – 20 %.

При определении опытной летальной дозы столбнячного токсина используют стандартный образец (СО) активности противостолбнячной сыворотки, калиброванный в МЕ по отношению к соответствующему международному стандартному образцу. СО разводят 0,9 % раствором натрия хлорида до концентрации 0,1 ME/мл. Готовят смеси, состоящие из 1 мл СО активности противостолбнячной лошадиной сыворотки, 2 мл 0,9 % раствора натрия хлорида и 1 мл одного из разведений столбнячного токсина. Смеси токсина с сывороткой осторожно перемешивают и инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение (45 ± 1) мин, затем вводят по 0,4 мл 4 белым мышам массой (17 ± 1) г под кожу бедра. За животными наблюдают 4 сут. Отмечают разведение токсина, которое в смеси со СО активности противостолбнячной сыворотки вызвало гибель от столбняка 50 % животных.

Определение специфической активности (титра) противостолбнячной сыворотки. Исходя из предполагаемой активности, сыворотку разводят 0,9 % раствором натрия хлорида до концентрации 0,1 МЕ/мл. Готовят несколько разведений, отличающихся друг от друга по активности на 10 – 20 %.

По 1 мл каждого разведения испытуемой сыворотки переносят во флаконы, добавляют по 2 мл 0,9 % раствора натрия хлорида и 10 опытных доз столбнячного токсина в объеме 1 мл. Полученные смеси осторожно перемешивают, избегая пенообразования, и после выдерживания при температуре (37 ± 1) ºС в течение (45 ± 1) мин вводят 4 белым мышам массой (17 ± 1) г под кожу бедра в объеме 0,4 мл.

Опыт сопровождают контролем опытной дозы токсина, для чего готовят смесь, содержащую 1 мл СО активности противостолбнячной сыворотки, разведенного до концентрации 0,1 МЕ/мл, 1 мл токсина, содержащего 10 опытных доз, и 2 мл 0,9 % раствора натрия хлорида. Смесь инкубируют при тех же условиях, что и испытуемую сыворотку, и вводят ее 4 белым мышам массой (17 ± 1) г под кожу бедра в объеме 0,4 мл. За животными опытной и контрольной групп наблюдают 4 сут, отмечая количество павших от столбняка мышей.

Специфическую активность (титр) сыворотки рассчитывают, исходя из наибольшего ее разведения, которое в смеси с опытной дозой токсина обеспечивает защиту 100 % мышей от столбняка. Тест не учитывают, если все мыши в контрольной группе остались живы без признаков столбняка.

Удельная активность

Не менее 1000 МЕ на 0,1 г белка. Удельную активность (Х) вычисляют по формуле:

где:

Т – титр сыворотки, МЕ/мл;

С – концентрация белка, г/мл;

10 – постоянный коэффициент.

Сульфат-ионы

Не более 0,025 %. Определение проводят колориметрическим методом. К 5 мл испытуемого образца и 5 мл рабочего эталонного раствора прибавляют по 0,5 мл 5 % раствора бария хлорида и перемешивают. Через 15 мин пробы перемешивают и измеряют оптическую плотность суспензий при длине волны 540 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм против контрольного раствора, содержащего 5 мл образца и 0,5 мл воды очищенной, для эталонного раствора – вода очищенная (5 мл).

Испытание проводят в 2 повторностях. Для расчета используется среднее значение.

Расчет содержания сульфат-ионов (X) в процентах производят по формуле:

где

Аопыт – значение оптической плотности испытуемого образца;

Аэталон – значение оптической плотности рабочего эталонного раствора.

Примечания.

1. Приготовление основного раствора калия сульфата (1 мг/мл сульфат-ионов). В мерной колбе вместимостью 1000 мл в воде очищенной растворяю 1,8140 г калия сульфата, высушенного до постоянной массы при температуре 100 – 105 °C, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Раствор хранят при комнатной температуре в течение 1 года.
2. Приготовление рабочего эталонного раствора калия сульфата (0,002 % сульфат-ионов). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл основного раствора калия сульфата, доводят водой очищенной до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.

Натрия хлорид

От 0,85 до 0,95 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Количественное определение хлоридов методом обратного осадительного титрования в иммунобиологических лекарственных препаратах».

Хлороформ

Не более 0,1 %. Определение проводят колориметрическим методом, основанным на способности хлороформа образовывать с резорцином в щелочной среде соединение хиноидной структуры, которое дает цветную реакцию.

В пробирки вносят по 0,1 мл испытуемого образца и образца сравнения (0,1 % раствор хлороформа), добавляют 0,9 мл 0,9 % раствора натрия хлорида, 2 мл 20 % раствора натрия гидроксида, 1 мл 10 % раствора резорцина и перемешивают. Содержимое пробирок перемешивают и нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 мин. Пробы осторожно охлаждают до температуры 15 – 18 0С, затем измеряют оптическую плотность окрашенного раствора при длине волны 540 нм в кювете с толщиной слоя 5 мм по сравнению с контрольным раствором, состоящим из 1 мл воды очищенной, 1 мл 0,9 % раствора натрия хлорида и 2 мл 20 % раствора натрия гидроксида. Раствор резорцина в контрольный раствор не добавляют, т.к. продукты его окисления окрашиваются в зеленый цвет.

Расчет содержания хлороформа проводят путем сравнения оптической плотности испытуемого образца и образца сравнения (0,1 % раствор хлороформа).

Содержание хлороформа (Х) в процентах в испытуемом образце вычисляют по формуле:

где:

Аисп – значение оптической плотности испытуемого образца;

Аст – значение оптической плотности образца сравнения — 0,1 % раствора хлороформа.

Примечания.

1. Приготовление 0,1 % раствора хлороформа. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл хлороформа, доводят объем раствора водой очищенной до метки и перемешивают. Раствор используют через 24 часа.
2. Приготовление 10 % раствора резорцина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 г резорцина, растворяют в 30 мл воды очищенной, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.

Извлекаемый объем

Не менее номинального. Определение проводят в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём лекарственных форм для парентерального применения».

Упаковка и маркировка

В соответствии сОФС «Иммунобиологические лекарственные препараты».

Транспортирование и хранение

При температуре от 2 до 8 ºС, если в нормативной документации нет других указаний. Замораживание не допускается.

Скачать в PDF ФС.3.3.1.0044.15 Сыворотка противостолбнячная лошадиная